Tecnologías y Plataforma de Ingeniería Celular

The Cell Technologies and Engineering Core houses 3 cell culture suites, 2 lab benches, and cell analysis. Each cell culture suite is outfitted with 3-4 bio-safety cabinets, 6-8 CO2 incubators, a low oxygen incubator, and inverted microscopes and requisite equipment for stem cell culture. The CTEC is located adjacent to the Citometría de Flujo: Servicio Central enabling efficient cell sorting and cytometry analysis experiments.

Instrumentación

Cell Imaging
2x Dissection microscopes for manual isolation and manipulation of stem cell colonies
2x Discover Echo Cellcyte live cell imagers housed within CO₂ incubators

Functional Analysis
Seahorse 96XFe for cell analysis
Maxwell Multielectrode array system for neuron activity analysis

Cell Culture
11x Biological safety cabinets
18x C0₂ Incubators
3x N2/C0₂ Incubators (hypoxic conditions)
3x Bench top centrifuges
3x 37°C Water baths

Transfection
LifeTech Neon – Tip based electroporation (adjustable parameters)
MaxCyte ExPERT A+X electroporator (Cuvette-based; fixed parameter)

Centrifugation
Optima L-80XP Ultracentrifuge
Allegra X-15R Plate centrifuge
Bench top temperature controlled centrifuge & microcentrifuge

Refrigerators and Freezers
3x -80°C freezers
10x -20°C freezers
6x 4°C refrigerators
2x High capacity deli refrigerators
2x MVE 800 Series Cyrostorage freezers – 11664 vial capacity, auto fill controllers
2x LABS40K High-Capacity Cryostorage freezers – 31590 vial capacity, auto fill controllers

Servicios

Procesamiento de biopsia (derivación de fibroblastos)
Reprogramación a partir de células madre pluripotentes inducidas (fibs) o células mononucleares de sangre periférica (PBMCs)
Edición genómica personalizada
Control de calidad de iPSC (por solicitud)

• Cariotipo
• Prueba de micoplasma
• Fuerza
• Undifferentiated state panel
• TriLineage differentiation
• Sendai virus genome retention assays

Control de calidad de Fibra (por solicitud)

• Micoplasma
• Tasa de crecimiento
• Análisis de perfiles de STR (solo humanos)

Control de calidad de edición genómica (por solicitud)

• Micoplasma
• Secuenciación de alelos
• Fuerza

Mouse model development services

• CRISPR design
• CRISPR genotyping
• Custom cloning/vector design and construction
• De novo ES cell Derivation
• DR4 and CF1 mEF cells
• ES cell expansion
• Gene targeting

Acceso
The Cell Technologies and Engineering Core Facility is available to researchers 7 days a week, 24 hours a day. Access to the facility must be arranged in advance and approved by the CTEC.

Condiciones de Uso

1. The Core Director must first approve all new cell lines that will be brought into the facility, including both live and frozen cell cultures, from both commercial and academic sources. All new, approved cell lines will be cultured under quarantine conditions until they have tested clean for mycoplasma in 2 consecutive tests.
2. All new CTEC users must be approved by, and go through a brief orientation with the Core Director, or Lab Manager.
3. Do not bring previously opened reagents, supplies or materials from other labs into the facility. In some instances this may be necessary, but must first be cleared with the Core Director. Unopened, direct from supplier, cell culture media and materials may be brought into the facility.

Aprobaciones del SCRO, capacitación en ética y MTAs:
Any research involving human pluripotent stem cells at the Salk Institute will require:

1. an SCRO approved protocol
and
2. ethics training for the researchers and PI involved with the experiments.

Por favor consulta el Sitio web de SCRO para obtener información sobre el cumplimiento de estos requisitos. Los requisitos para la aprobación variarán según el proyecto de investigación. El Director del Núcleo y el personal pueden ayudar a los nuevos investigadores con el proceso de completar los protocolos SCRO. Para fines de capacitación, los nuevos investigadores pueden comenzar a trabajar bajo el protocolo de capacitación existente en técnicas de cultivo de células madre. Sin embargo, a medida que el o los investigadores desarrollen su propio proyecto de investigación, se deberá obtener una aprobación SCRO separada.

La información sobre capacitación en ética se puede encontrar en línea. here»

Salk researchers working in the CTEC are covered under the existing MTAs for the cell lines provided. Should an investigator want to culture one of the cell lines below in their own lab, a separate MTA would need to be executed.

Líneas Celulares Disponibles

Todas las líneas celulares son cariotípicamente estables, libres de patógenos y se cultivan sin antibióticos. Líneas celulares adicionales disponibles bajo petición.

Líneas de Células Madre Embrionarias Humanas Disponibles:

Líneas de células madre pluripotentes inducidas por humanos disponibles:
iPSC específicas para enfermedades: ¿Está buscando una línea de iPSC específica relacionada con alguna enfermedad? Es posible que ya exista y podríamos ayudarle a encontrarla.

Otros tipos de células disponibles:
Queratinocitos - Adultos
Queratinocitos neonatales
Fibroblastos BJ
IMR90s
OP9s
293Ts
GFF
MEF
HUVEC

Consideraciones de la MTA
Salk researchers working in the CTEC are covered under the existing MTAs for the cell lines provided. Should an investigator want to culture one of these cell lines in their own lab, a separate MTA would need to be executed.