Chris E.: Bienvenido al podcast de Salk Talk. Soy su anfitrión, Chris Emery. En el podcast de hoy, entrevisto al Dr. Sam Pfaff. El Dr. Pfaff es profesor en el Instituto Salk, así como investigador del Instituto Médico Howard Hughes y titular de la Cátedra Benjamin H. Lewis. Para obtener más información sobre el Instituto Salk y su investigación, visite www.salk.edu.
Dra. Pfaff, gracias por acompañarnos hoy. A principios de este año estuve en su oficina y me mostró estas hermosas imágenes de haces de neuronas de colores brillantes, creciendo en una placa de laboratorio. Y tenías un video de estos paquetes y destellaban como luces estroboscópicas y me dijiste que los habías llamado "circuitoides". ¿Es así como lo dices?
Samuel Pfaff: Eso es correcto, Chris.
Chris E.: ¿Qué son exactamente los circuitoides?
Samuel Pfaff: Es uno de los lujos que tenemos en ciencia. A veces se nos ocurre algo nuevo, nos damos el lujo de ponerle nuestro propio nombre. Ya sea que el nombre circuitoide se mantenga o no a largo plazo, el tiempo lo dirá. Lo que pretendíamos transmitir con el nombre circuitoide era la idea de que habíamos construido lo que podría considerarse como un circuito muy sintético. Y se construyó a partir de células madre embrionarias. En nuestro caso, las células madre embrionarias de ratón, porque podemos modificarlas genéticamente para ver y rastrear diferentes tipos de células. Y estábamos muy interesados en generar tipos específicos de neuronas que normalmente se encuentran dentro de la médula espinal, a partir de células madre embrionarias. Luego preguntamos si podíamos combinar esas neuronas purificadas que derivamos de células madre embrionarias de manera que comenzaran a producir una actividad que normalmente encontraríamos dentro de la médula espinal.
Y la actividad que buscábamos era el tipo de actividad que es, en el campo conocido como actividad de generador de patrón central. Y lo que esa actividad representa es un tipo de circuito central dentro de su médula espinal que impulsa el movimiento de pasos alternativos de nuestras piernas. Y una de las características distintivas de ese circuito es que se alterna. Está encendido y apagado.
Chris E.: ¿Y ese fue el parpadeo?
Samuel Pfaff: Y ese fue el destello. Así que habíamos diseñado células, bueno, primero habíamos producido diferentes tipos de neuronas que encontrarías en la médula espinal. Entonces los combinaríamos en un plato, de alguna manera, en las combinaciones adecuadas. Y luego los expusimos a algunas de las drogas, algunos de los neurotransmisores que normalmente estarían presentes dentro de la médula espinal. Y por sí solos asumieron la actividad del Generador Central de Patrones, y comenzaron a parpadear. Casi como si estuvieran tratando de enviar la instrucción de que queremos producir un tipo de ritmo de caminar o caminar. El nombre circuitoide suena un poco tonto, en realidad proviene de una historia más larga de otros tipos de términos relacionados. Y en el campo de las células madre, ya se había acuñado el término embrioide y organoide. Y puede adivinar que se debe a que las células madre se han utilizado para producir tejidos similares a embriones y órganos. Y debido a que habíamos producido un tejido similar a un circuito, lo extendimos al nombre de circuitoide.
Chris E.: Entonces, ¿qué haces con un circuitoide? Los tienes, los pusiste en un plato, crecieron juntos para formar este tipo de circuitos básicos que puedes encontrar en la médula espinal. ¿Cuál es el siguiente paso?
Samuel Pfaff: Estoy asintiendo con la cabeza porque... Nadie puede ver eso. Así que una variedad de cosas. El tipo de preguntas que pensamos que eran inmediatamente accesibles con el sistema eran preguntas relacionadas con la comprensión de cosas como ¿cómo se regula la velocidad de los pasos? Realmente no tenemos una gran idea de cómo se hace eso. Y planteamos la hipótesis de que tener diferentes proporciones de neuronas reclutadas dentro del circuito podría influir en la rapidez o la lentitud del ritmo que produce el circuito, podría influir en esa ritmicidad.
Entonces pudimos probar eso directamente tomando neuronas purificadas y combinándolas en diferentes proporciones y luego midiendo la velocidad del parpadeo que viste. Y descubrimos que un grupo particular de neuronas, cuando cambiamos su concentración, era capaz de cambiar la tasa de actividad del circuito. Y ese sería el tipo de experimento que sería muy difícil de hacer en un animal donde es difícil entrar y simplemente cambiar la proporción de neuronas entre sí. Es el tipo de cosa que podríamos aprovechar en un plato. Podemos controlar los números, y esa fue una de las cosas que hicimos.
Ahora, en el futuro, tenemos grandes esperanzas de que podamos expandir esto a estudios en los que comencemos a pensar en cómo podríamos aprovecharlo para comprender los tratamientos para las lesiones de la médula espinal. Y ahora mismo hay proyectos en curso en el laboratorio en los que estamos tomando algunas de las células que hemos estudiado en el contexto del circuitoide y comenzando a trasplantarlas nuevamente a la médula espinal. Estos son estudios con animales, estudios con ratones y observar cómo las neuronas se integran dentro de su entorno de acogida. Entonces, los próximos pasos para nosotros, uno de los próximos pasos es ver cómo podríamos aplicar esto a algo que sea clínicamente relevante. Pero habiendo dicho eso, todavía hay muchos problemas fundamentales que deben resolverse con respecto a comprender cómo un circuito realmente procesa la información, tener un sistema reducido que podemos mirar en un plato, ver en tiempo real, es mucho más sistema accesible que estudiar un animal. Y también estamos tratando de entender principios muy fundamentales sobre cómo funciona el circuito.
Chris E.: Entonces, dando un paso atrás, ¿cómo se involucró e interesó en la investigación de la médula espinal? El sistema nervioso es un lugar grande. ¿Cómo aterrizaste en la médula espinal?
Samuel Pfaff: Correcto. Ya sabes, en parte es interés y en parte fue buena suerte, diría yo. Si no te importa, ¿puedo tomarme un poco de tiempo y contarte sobre mi carrera?
Chris E.: Absolutamente.
Samuel Pfaff: Bien, entonces esta será quizás una historia un poco larga que llegue a su eventual pregunta aquí. Crecí en Minnesota y mi padre trabajaba en la Clínica Mayo. Probablemente se me consideraba un niño bastante nerd, aunque, como mucha gente en Minnesota, también pasaba mucho tiempo al aire libre.
Chris E.: ¿En el verano?
Samuel Pfaff: En el verano. Pero, ya sabes, en Minnesota la gente no habla del mal tiempo. Solo hazlo. Así que era mucho el verano y el invierno al aire libre. Pero yo estaba muy, muy interesado en la ciencia. Sabes, tenía una colección de fósiles. Tenía colecciones de insectos. Toda clase de cosas. Yo tenía mi propio pequeño microscopio. Simplemente estaba fascinado por todo lo que podía ver y empezar a entender, que especialmente tenía un contexto biológico. Y tuve la suerte de tener la oportunidad, incluso cuando era estudiante de secundaria, de trabajar en un laboratorio de investigación en la Clínica Mayo. Y mi primer contacto con la investigación fue en el área de las enfermedades neurales. Algo llamado neuropatías periféricas. Y era un laboratorio dirigido por un médico, por lo que todo estaba muy relacionado con las enfermedades.
En ese momento, no formulé necesariamente un deseo específico de trabajar solo en el sistema nervioso o en la médula espinal, pero realmente sabía que amaba la investigación biológica. Simplemente me fascinó por completo. Así que fui a la universidad, por supuesto. Fui a la universidad en Carleton College en Minnesota. Es una escuela de artes liberales. Me fue mal en todo lo que no estaba relacionado con la ciencia, lo que solo reforzó mi deseo-
Chris E.: ¿Estabas en el camino correcto?
Samuel Pfaff: Que estaba en el camino correcto. Pero resulta que, para cualquier joven que esté pensando en la ciencia, la escritura y la comunicación son una parte increíblemente importante de la ciencia, y una educación integral ciertamente valdrá la pena. Bien, fui a Carleton y tomé, una de las clases que tomé fue en biología del desarrollo. embriología fetal. Una de las cosas que hicimos fue ver cómo se desarrollaba un embrión de rana a partir de un óvulo fertilizado.
Y un embrión de rana puede desarrollarse en aproximadamente 24 horas, y puede pasar de un óvulo fertilizado a un renacuajo nadador que reacciona con su entorno en 24 horas, y puedes verlo en tiempo real. Estaba tan fascinado que me quedé despierto toda la noche en el laboratorio observando en el microscopio las divisiones celulares y, de repente, esta cosa pudo nadar, sentir el tacto y respirar. Y pensé: "Ese es un proceso biológico tan notable". Hay un millón de preguntas relacionadas con cómo pasar de una célula a hacer todo tipo de células especializadas, construyendo un sistema nervioso.
El tipo de biología que realmente me encantaría hacer es la biología que se relaciona con el desarrollo fetal. Así que después de la universidad fui a UC Berkeley, en parte porque tenían un grupo fenomenal de científicos que estudiaban embriología. Y era mi intención hacer un doctorado en el área de embriología. Pero este también fue un momento floreciente en biología molecular, cuando fue posible comenzar a clonar genes y estudiar realmente la función de los genes. Todavía era temprano, pero estaba claro que esta iba a ser la herramienta que realmente ayudaría a dar forma a nuestra comprensión de la biología.
Y en ese momento me enfrenté a una decisión difícil al decidir a qué laboratorios ir. ¿Debería ir a un laboratorio que es lo que caracterizaría como embriología tradicional que realmente estudia cosas a nivel celular, o debería pensar en capacitarme en más sistemas moleculares y volver a estudiar biología del desarrollo con un enfoque molecular? Y decidí que realmente necesitaba desarrollar mis habilidades para comprender la biología molecular y volver a los problemas de la embriología, porque eso era, realmente quería estudiar la embriología a nivel molecular. Así que entré en un laboratorio que estudiaba la biología del cáncer pensando que el cáncer era algo opuesto al desarrollo. Es realmente una especie de aberración del desarrollo y una mala regulación de la identidad celular. Y aprendí mucho de biología molecular en ese contexto.
Y luego pasé a hacer una beca posdoctoral en la que comencé a trabajar en embriología en embriones de rana y a aplicar mis habilidades moleculares. Pero sentí que no estaba del todo en el punto en el que podría obtener el tipo de puestos docentes que quería. Y un puesto de ensueño para mí era llegar a un lugar como el Instituto Salk, que es ciencia pura y sin adulterar, sin otras distracciones. Y como no iba a poder dar ese paso directamente, decidí hacer otra beca posdoctoral. Y en ese momento, había un científico muy conocido, aún al comienzo de su carrera, llamado Tom Jessell, quien también es miembro no residente del Instituto Salk, quien fue una de las personas líderes en la aplicación de técnicas moleculares para comprender el desarrollo. .
Y el desarrollo que le interesaba mucho era el desarrollo del sistema nervioso. Y había tomado la decisión muy consciente de estudiar la médula espinal pensando que la médula espinal, sabiendo que la médula espinal era funcionalmente importante, por supuesto, para muchas de las actividades y comportamientos que realizamos como humanos. Pero más allá de eso, sabiendo que la médula espinal es parte del sistema nervioso central pero quizás una parte relativamente simple del sistema nervioso. Y si vas a empezar en algún lugar, resolvamos los principios básicos en el sistema más simple.
Así que fui al laboratorio de Jessell y eso realmente consolidó mi, que está en la Universidad de Columbia... Eso realmente consolidó mi interés en los estudios de desarrollo molecular del sistema nervioso, y realmente centró mi atención en la médula espinal, y en particular, la parte de la médula espinal que controla el movimiento. Y desde ese entrenamiento con Tom Jessell, que ahora es un poco más de veinte años, mi laboratorio ha adoptado una variedad de enfoques para estudiar la médula espinal y, en particular, estudiar el movimiento. Pero ha sido moldeado en gran medida por la trayectoria profesional que acabo de describir y especialmente por el mentor Tom Jessell. Así que esa fue la respuesta larga, me disculpo.
Chris E.: No, no lo hagas. Eso es exactamente lo que quería saber, cómo llegaste a este lugar. Sabes, es divertido, creo que mucha gente, incluido yo mismo, cuando pensamos en la columna vertebral o la médula espinal y el sistema motor, hay una tendencia a pensar en ello como una especie de cables entrantes y salientes. El cerebro lo hace todo, pero al hablar contigo y con otras personas aquí en Salk, aprendes rápidamente que suceden muchas más cosas fuera del cerebro. Mucho más computación y circuitos más complejos que suceden cosas de las que no somos conscientes en el nivel consciente, ya sabes, debajo de nuestro cuello.
Samuel Pfaff: Correcto, entonces y ahora estás entrando en áreas que me mantienen despierto hasta altas horas de la noche, y en qué pienso cuando me ducho, así que siento ser tan personal. Sí, cuando se trata de nuestra capacidad de controlar nuestros movimientos, que es una de las cosas fundamentales que hacemos. Creo que la mayoría de la gente intuitivamente se da cuenta de que cuando interactuamos con nuestro mundo, como nos comportamos, en realidad es una consecuencia de nuestra capacidad de movernos.
Y hay muchas partes diferentes del sistema nervioso que contribuyen a nuestra capacidad de movimiento. Y puede descomponerlo de varias maneras, en términos de diferentes partes del sistema nervioso, por lo que Motor Cortex es una parte muy crítica del área del sistema nervioso que controla el movimiento, pero también ha tocado algo. eso es cada vez más evidente, y es que hay múltiples capas de circuitos dentro del cerebro, el tronco encefálico y la médula espinal, cada uno de los cuales pesa en el procesamiento de los comandos para regular el movimiento.
Y lo hacen de varias maneras, así que en lugar de entrar en una conferencia didáctica muy larga sobre el tema, tal vez hay algunas cosas intuitivas que podemos tocar. Entonces, una de las cosas intuitivas es que cuando tocas una sartén caliente, todos reconocemos el hecho de que alejaremos nuestra mano de eso muy rápidamente y, a menudo, incluso antes de que percibamos el dolor en sí. Y ese tipo de respuesta, conocida por todos como un reflejo, es tan rápida que corta muchos de los circuitos que se controlan a nivel del cerebro. Es simplemente una señal del cerebro que se envía desde la piel de regreso a la médula espinal, y luego tiene que ocurrir el procesamiento, luego la médula espinal transmite una señal "Mueve tu mano".
Ahora, tan simple como suena mover, simplemente mueva su mano, la realidad es que la forma en que movemos nuestra mano, incluso en el contexto de este tipo de respuesta subconsciente, se hace de una manera muy, muy precisa. No empujamos nuestra mano más adentro de la sartén. Retiramos la mano. Y dependiendo de dónde comience su mano, la respuesta que activa se controla con mucha precisión. Y la razón por la que lo señalo es para tratar de sacar a relucir el problema de que, aunque los reflejos son un tipo de respuesta muy simple, que conduce al movimiento de una extremidad, está altamente regulado en el sentido de que muchos músculos diferentes dentro de su mano, dentro de su muñeca, dentro de su antebrazo, dentro de su bíceps y tríceps y hombro, todos están trabajando juntos y eso es mucho procesamiento neurológico que tiene que suceder. Y sucedió sin tener que usar ninguna parte del cerebro. Ocurrió todo a nivel de la médula espinal.
Chris E.: No hay un pensamiento consciente de “voy a hacer esto”.
Samuel Pfaff: Así es. Y son cosas como esa las que nos han revelado que la médula espinal en sí misma no es solo un centro de transmisión o cableado, sino que realmente es una capa importante de circuitos que controla nuestros movimientos. Y tal vez para llevar esto un paso más allá... El desafío al que nos enfrentamos al tratar de entender cómo controlamos nuestros movimientos, puede dividirse en un problema computacional de realmente tratar de entender cómo son aproximadamente 650 músculos en nuestro cuerpo. siendo regulado. Y cada vez que realizamos incluso una tarea simple como tomar una taza de café y la acabo de levantar... Ese tipo de tarea simple probablemente use del orden de cien músculos diferentes.
Y no es simplemente “Activemos cien músculos”. Es "Activemos cien músculos con el tiempo relativo correcto y las fuerzas relativas en comparación entre sí". Y podemos realizar ese tipo de movimientos con muy poco pensamiento. Puedes estar conduciendo, caminando por la calle, pensando en todo tipo de otras cosas y lucir como una persona bastante coordinada mientras te mueves por el mundo. Si reduce eso a un problema que una supercomputadora tuvo que resolver, sería un desafío enorme para una supercomputadora debido a todos los cálculos sobre bien, ¿qué músculo voy a usar? ¿En qué orden lo voy a usar? ¿Cómo voy a obtener retroalimentación para saber si no estoy aplastando la taza o si la estoy sosteniendo tan suavemente que la voy a dejar caer? Y es una de las razones por las que si miras incluso a los robots bastante sofisticados, parecen bastante robóticos y rígidos. Es porque los cálculos son enormes.
Se supone que el sistema nervioso y, en parte, la médula espinal han encontrado formas de resolver estos cálculos de manera muy eficiente. Donde, ya sabes, las supercomputadoras usan enormes cantidades de energía y tienen acondicionadores de aire para enfriarlo, ya sabes, no estamos construidos de esa manera. Entonces, presumiblemente, la biología ha encontrado algunas soluciones bastante inteligentes para ejecutar algunos cálculos muy complejos. Y es ese tipo de complejidad lo que realmente nos intriga. Queremos entrar allí y entender cómo está procesando la información el circuito neuronal dentro de la médula espinal, y cómo lo está haciendo bien y de manera tan eficiente.
Ahora mencioné el hecho de que estamos interesados en el desarrollo neural, y mencioné cosas como las células madre, y ahora, cuando hablo de circuitos, quizás se pregunten si existe algún tipo de relación entre los dos. Y lo hay, en parte porque para comprender cómo funciona el sistema, uno de los enfoques que hemos tomado es tratar de ver cómo la naturaleza lo armó en primer lugar. Y la lógica es que si podemos pararnos en la línea de ensamblaje, que es el desarrollo fetal, podemos ver cómo se construyen y ensamblan todas las partes para que podamos tener una mejor comprensión de cómo funciona realmente la máquina. Muchos de nuestros estudios combinan estudios de desarrollo con estudios de circuitos para comprender mejor cómo la médula espinal y el sistema nervioso procesan la información.
Chris E.: Así que entender cómo funciona también sienta las bases para entender qué es lo que sale mal cuando nos enfermamos. Su laboratorio descubrió recientemente que, cuando falta una molécula llamada MicroARN, hace que las neuronas motoras de la médula espinal se degeneren. Entonces-
Samuel Pfaff: Sí.
Chris E.: En primer lugar, ¿qué es un microARN? Para nuestros oyentes.
Samuel Pfaff: Un MicroARN es un lindo ARN porque es pequeño. Son ARN que tienen solo unos 22 nucleótidos de longitud. Y es todo un mundo de regulación genética que los biólogos y los biólogos moleculares ni siquiera sabían que existía hasta hace unos veinte años. A través de experimentos genéticos muy simples que se estaban haciendo en sea elegans. Y reveló un tipo de regulación genética que nunca podríamos haber predicho si no nos hubiéramos topado con ella.
Primero se encontró en gusanos simples, y ahora sabemos que este tipo de regulación también existe en la mayoría de las especies, incluidos los humanos. Y que es una forma adicional importante en la que controlamos el nivel en que se producen los genes dentro de cada una de nuestras células. Nos interesamos en este microARN en particular que no tiene nombres muy pegadizos, solo están numerados. Y entonces, en el que trabajamos, hemos trabajado y aún trabajamos es MicroRNA 218. Y encontramos eso porque estábamos muy interesados en las neuronas motoras espinales. Estas son las neuronas que residen dentro de la médula espinal y tienen axones largos y delgados que se extienden desde la médula espinal hasta los músculos. Y son las neuronas que necesitas activar si quieres que un músculo pueda contraerse.
También son las neuronas que se ven afectadas por las enfermedades. Enfermedades como la ELA, por lo que estamos grabando este podcast en este momento, y es aproximadamente una semana después de que Sam Shepard falleciera... Actor y dramaturgo. Falleció de ELA. Es una enfermedad neurodegenerativa y conduce selectivamente a la pérdida de neuronas motoras. Y la consecuencia de esa enfermedad es que se conservan muchos aspectos del cerebro, por lo que las personas con la enfermedad a menudo son muy conscientes de lo que está sucediendo, mantienen todas sus funciones cognitivas, pero no pueden moverse. Y si no puedes moverte, eso es increíblemente inconveniente, pero también pone en peligro tu vida, porque eventualmente no podrás respirar, no podrás comer, no podrás tragar. Y por lo tanto se convierte en una enfermedad letal. No tenemos absolutamente ningún tratamiento que sea efectivo para prevenir la ELA.
Hay otra forma fetal, diré, de ALS, que es una enfermedad llamada atrofia muscular espinal, abreviada SMA. Y también se debe a la pérdida de neuronas motoras. Entonces, a partir de muchos estudios anteriores sobre AME y ALS, comenzamos a obtener algunas pistas sobre los factores de riesgo genéticos que causan esas enfermedades. Y una de las cosas que se estaba volviendo cada vez más evidente en esta información acumulada era que la forma en que se procesaba el ARN podría verse afectada en estas enfermedades. Ahora estoy hablando de generalidades, así que pido disculpas a algunos de los verdaderos expertos, pero este fue el tipo de pista que nos llevó a preguntarnos si no había un MicroARN presente en las neuronas motoras que podría ser crítico para regula la actividad génica en las neuronas motoras y podría verse afectado en estas enfermedades en las que las neuronas motoras degeneran.
Entonces, una de las cosas que explotó absolutamente durante la última década fue la capacidad de hacer lo que se llama secuenciación de próxima generación, ahora es muy factible ingresar y secuenciar todas las transcripciones de ARN en un tipo de célula y comprender qué los genes están siendo activados en una célula. Y usamos esa tecnología para identificar o encontrar que había un MicroARN dentro de las neuronas motoras que era muy, muy selectivo para esas neuronas motoras. A los que me he referido como MicroARN 218. Y a partir de ahí, pasamos a mostrar que si evitas que MicroARN 218 se active dentro de las neuronas motoras, esas neuronas motoras comienzan a degenerar. Y esto es ahora una prueba irrefutable que nos indica que tal vez uno de los problemas subyacentes con la degeneración de las neuronas motoras es la incapacidad de activar o regular adecuadamente cómo se produce y funciona el MicroARN 218 dentro de las neuronas motoras.
Así que tenemos una serie de proyectos en marcha en el laboratorio para realmente comenzar a tratar de determinar si existe un vínculo crítico entre la degeneración motora y el MicroARN 218. Más allá de eso, los MicroARN son generalmente bastante importantes para regular la función celular y tenemos la suerte de trabajar en una institución que es muy adecuada para este tipo de estudios moleculares, y algunos de nuestros experimentos realmente están generando información nueva y fundamental sobre cómo se procesan los microARN y cómo los microARN realmente regulan la actividad de los genes.
Con suerte, aprenderemos algunas cosas importantes sobre las enfermedades motoras y también espero que algo de eso se extienda a la comprensión de cómo también se controla la regulación génica en otros tipos de células. Incluso si no está directamente controlado por miRNA 218, puede estar controlado por otros MicroRNA análogos.
Chris E.: Entonces, ¿eres ciclista?
Samuel Pfaff: Sí.
Chris E.: Obviamente una actividad orientada al movimiento. Alguna vez-
Samuel Pfaff: Un ciclista, sí.
Chris E.: Un ciclista. ¿Hay una distinción allí?
Samuel Pfaff: Tengo que confesar que también me encanta andar en moto, así que.
Chris E.: Dos ruedas.
Samuel Pfaff: Sí, paso la mayor parte de mi tiempo en bicicletas de dos ruedas.
Chris E.: ¿Alguna vez te encuentras, mientras pedaleas, pensando en usarte a ti mismo como un modelo experimental?
Samuel Pfaff: Sí y no. Hay momentos en los que sufro mucho al subir colinas y no estoy seguro de lo que pasa por mi cerebro aparte de "Espero llegar a la cima". De hecho, mi hija me desafió recientemente con una pregunta de ¿por qué andas en bicicleta? ¿Por qué te gusta tanto montarlo? Y mientras pensaba, ella dijo: "Papá, apuesto a que es porque solo estás tratando de mantener tus telómeros largos". Lo que me hizo reír porque pensé que iba a decir algo así como que es una forma saludable de estar en forma en general. Pero, en cambio, volvió con la respuesta de los telómeros, que es una especie de broma interna porque el Instituto Salk, en el Instituto Salk, nuestra presidenta es Elizabeth Blackburn, quien ganó el Premio Nobel por su trabajo fundamental sobre los telómeros. Así que creo que tal vez fue apropiado que hiciera referencia a los telómeros.
Chris E.: Estaba muy conectada.
Samuel Pfaff: Sí.
Chris E.: Bueno, Dr. Pfaff, muchas gracias por acompañarnos hoy y compartir su trayectoria profesional y parte del trabajo que está realizando. Gracias.
Samuel Pfaff: Chris, un placer. Gracias.
Chris E.: Para obtener más información sobre el Instituto Salk y su investigación, visite www.Salk.edu.