نقل الجينات والاستهداف والمداواة
المتجهات الفيروسية الأساسية

• إنتاج ناقلات فيروسية عدسية، وفيروسات رجعية، وفيروسات غدية، وفيروسات داء الكلب المحذوفة من الجين G
• إنتاج وتوزيع ناقلات الفيروسات القهقرية والعدوانية والفيروسات الغدية والفيروسات العصوية المحذوفة من الجين G والتي تعبر عن الجينات المتحولة المراسل
• استشارة حول التصميم التجريبي والتطوير واستخدام النواقل الفيروسية المخصصة
• إنتاج وتوزيع مجموعات عينات من النمط المصلي لفيروس الأنفلونزا AAV المفيدة للدراسات التجريبية

ما يجب تقديمه إلى الجوهر:

1. 200 ميكروجرام (يفضل >1 ميكروجرام/ ميكرولتر) من بلازميد الفيروس العكوس أو بلازميد فيروس الغدة الدرقية. إذا طُلب إنتاج فيروس الغدة الدرقية على نطاق واسع، يلزم 500 ميكروجرام من بلازميد فيروس الغدة الدرقية. يجب تنقية الحمض النووي باستخدام بروتوكول خالٍ من السموم الداخلية (على سبيل المثال، مجموعات تنقية بلازميد ماكسي/ميجا/جيجا الخالية من السموم الداخلية أو ما يعادلها). لا نقبل الحمض النووي المنقى باستخدام تحضيرات صغيرة.
2. يجب فحص DNA البلازميد للتأكد من نقاوتها وأن يكون لها A260 / 280 من> 1.8.
3. يجب فحص بلازميدات AAV ITR للتحقق من إعادة التركيب عن طريق الهضم باستخدام SmaI أو XmaI. يحتوي كل ITR على موقعين SmaI/XmaI؛ وسوف يؤدي الهضم إلى قطع الإدخال. تشير الكميات الزائدة من البلازميد الخطي كامل الطول إلى حدوث إعادة التركيب.
4. يجب تأكيد البلازميدات المنقولة الفيروسية العدسية والفيروسية الرجعية عن طريق الهضم الإنزيمي أو التسلسل.
5. يرجى تقديم صورة هلامية لبلازميد AAV2 ITR المهضوم من SmaI أو XmaI ، أو بلازميد النقل الفيروسي البطيء مع إزالة الجزء الداخلي.
6. لتجنب إعادة التركيب، نوصي بتحويل ونمو البلازميدات الناقلة للفيروسات العكوسة وفيروس الغدة الدرقية في الخلايا التي تعاني من نقص إعادة التركيب مثل STBL3 عند 30 درجة مئوية في مرق 2XYT لمدة لا تزيد عن 16 ساعة.
7. خريطة المتجهات وملف التسلسل، إذا كانت متاحة.
8. معلومات حول الجين الذي يهمك أو أدخل أي متطلبات خاصة للتعامل معه: سام، أو مسبب للسرطان، أو يسبب موت الخلايا المبرمج، وما إلى ذلك.

الأوراق الحديثة ذات الاهتمام

• نقل ناقل فيروسي انتقائي لـ ErbB4 معربًا عن الخلايا العصبية الداخلية القشرية في الجسم الحي باستخدام مستقبلات فيروسية - بروتين جسر يجند. ، Choi وآخرون ، Proc Natl Acad Sci
• يكشف فيروس داء الكلب أحادي المشبك عن تنظيم شبكة ما قبل الحركة وخصوصية متشابكة لخلايا التقسيم الكولينية. Stepiene وآخرون ، Neuron
• الخطوة التالية في توصيل الجينات: الهندسة الجزيئية للأنماط المصلية للفيروسات المرتبطة بالغدة. فاوست وآخرون ، جي مول سيل كارديو
• مثبطات البروتوزوم تقلل من عرض حاتمة الببتيد المشتقة من AAV2 على معقد التوافق النسيجي الكبير من الفئة الأولى بعد التحويل. فين وآخرون ، مول ثير
• الحاجز الدموي الدماغي لحديثي الولادة فعال وظيفيًا ، وعدم النضج لا يفسر الاستهداف التفاضلي لـ AAV9. سوندرز وآخرون ، Nat Biotech
• يتيح الإعطاء الوريدي لـ AAV9 التكميلي الذاتي تسليم الجينات المحورة إلى الخلايا العصبية الحركية البالغة. دوكي وآخرون ، مول ثير
• نقل عالي الكفاءة لشبكية الفأر عن طريق نواقل النمط المصلي AAV المتحولة من التيروزين. Petrs-Silva et al.، Mol Ther
• تحليل مقارن لنواقل الفيروسة البطيئة المستندة إلى HIV-1 والتي تحمل البروتينات السكرية لفيروس ليسسا لنقل الجينات العصبية. Federici et al.، Genet Vaccines Ther. فيديريسي وآخرون ، اللقاحات الجينية

روابط مفيدة

• إنتاج وتوصيف النواقل الفيروسية المرتبطة بالغدة المؤتلفة - معمل سامولسكي
• آدجين - توزيع البلازميدات المفيدة بما في ذلك أنظمة التغليف الفيروسية من الجيل الثاني والثالث.