유전자 전달, 표적화 및 치료
바이러스 벡터 코어

• 맞춤형 렌티바이러스, 레트로바이러스, AAV, G-삭제 광견병 및 아데노바이러스 벡터 생산
• 리포터 트랜스진을 발현하는 스톡 렌티바이러스, 레트로바이러스, AAV, G-삭제 광견병 및 아데노바이러스 벡터의 생산 및 유통
• 맞춤형 바이러스 벡터의 실험 설계, 개발 및 사용에 대한 컨설팅
• 시범 연구에 유용한 AAV 혈청형 키트의 생산 및 유통

코어에 제공할 항목:

1. 200ug(바람직하게는 >1ug/ul)의 렌티바이러스 또는 AAV 플라스미드. 대규모 AAV 생산이 요청되는 경우 500ug의 AAV 플라스미드가 필요합니다. DNA는 엔도톡신 없는 프로토콜(예: 엔도 없는 맥시/메가/기가 플라스미드 정제 키트 또는 이와 동등한 제품)을 사용하여 정제되어야 합니다. 미니프렙 정제 DNA는 허용하지 않습니다.
2. 플라스미드 DNA는 순도를 확인하고 >260의 A280/1.8을 가져야 합니다.
3. AAV ITR 플라스미드는 SmaI 또는 XmaI로 소화하여 재조합 여부를 확인해야 합니다. 각 ITR에는 SmaI/XmaI 부위가 두 개 포함되어 있습니다. 소화하면 삽입물이 잘립니다. 선형화된 전체 길이 플라스미드가 너무 많으면 재조합이 발생했음을 나타냅니다.
4. 렌티바이러스와 레트로바이러스 전이 플라스미드는 효소 분해 또는 시퀀싱을 통해 확인해야 합니다.
5. SmaI 또는 XmaI 분해된 AAV2 ITR 플라스미드 또는 절단된 삽입물이 있는 렌티바이러스 전달 플라스미드의 겔 이미지를 제공하십시오.
6. 재조합을 피하기 위해, STBL3와 같은 재조합 결핍 세포에서 렌티바이러스와 AAV 전이 플라스미드를 형질 전환하고 성장시키는 것을 권장합니다. 이때 배양 시간은 30°C, 2XYT 배지에서 16시간을 넘지 않아야 합니다.
7. 벡터 맵과 시퀀스 파일(가능한 경우)
8. 관심 유전자에 대한 정보나 취급에 대한 특별한 요구 사항(독성, 발암성, 세포사멸 촉진 등)을 삽입하세요.

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유용한 링크

• 재조합 아데노 관련 바이러스 벡터의 생산 및 특성 규명 – 사물스키 연구실
• 애드진 – 2세대 및 3세대 렌티바이러스 패키징 시스템을 포함한 유용한 플라스미드의 배포.