El N\u00facleo BPHO ofrece capacitaci\u00f3n y equipos tanto para microscop\u00eda \u00f3ptica como electr\u00f3nica, procesamiento de muestras, obtenci\u00f3n de im\u00e1genes y an\u00e1lisis. Adem\u00e1s de la Directora, la Dra. Daniela Boassa, el BPHO cuenta con dos especialistas en imagen a tiempo completo, la Dra. Elsie Quansah y Chynna Bowman, quienes tienen experiencia en microscop\u00eda \u00f3ptica y electr\u00f3nica, as\u00ed como en an\u00e1lisis de datos.<\/p>\n
Materiales de Capacitaci\u00f3n, Protocolos y Manuales<\/a><\/p>\n El Centro de Biofot\u00f3nica de Servicios Centrales existe para brindar a los profesores de Salk soporte t\u00e9cnico y acceso log\u00edstico a tecnolog\u00edas de imagen de vanguardia para permitir la pr\u00f3xima generaci\u00f3n de avances biol\u00f3gicos en el Instituto.<\/p>\n <\/p>\n Hay tres LSM 880s con Airyscan en el Core (referidos como 880-1, 880-2, 880-3). Est\u00e1n equipados con las siguientes l\u00edneas de l\u00e1ser: 405, 458, 488, 514, 561, 594 y 633 nm. Cuentan con un detector interno GAsP de 34 elementos refrigerado por l\u00edquido para im\u00e1genes espectrales completas de sensibilidad de mol\u00e9cula \u00fanica en todo el espectro visible y un detector de luz transmitida para im\u00e1genes DIC. Estos microscopios cuentan con el m\u00f3dulo Airyscan FAST para una resoluci\u00f3n r\u00e1pida y mejorada (aproximadamente 1.7 veces mayor que los microscopios confocales est\u00e1ndar). Platina motorizada X, Y y platina de enfoque galvo Z. El software de adquisici\u00f3n es Zen Black (Zen 2.3).<\/p>\n 880-1 (invertido)<\/strong> 880-2 (invertido)<\/strong> 880-3 (vertical)<\/strong> Este microscopio invertido est\u00e1 equipado con las siguientes l\u00edneas l\u00e1ser: 405, 458, 488, 514, 561, 594 y 633 nm. Tambi\u00e9n est\u00e1 equipado con un detector interno de 34 elementos para im\u00e1genes espectrales completas en el espectro visible y un detector de luz transmitida para im\u00e1genes DIC. Equipado con un m\u00f3dulo Definite Focus. El software de adquisici\u00f3n es Zen Black (ZEN 2.3).<\/p>\n Objetivos: 10x\/0.45, 20x\/0.8, 20x\/1.0 W, 63x\/1.4 Aceite<\/p>\n<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n Este microscopio invertido est\u00e1 equipado con las siguientes l\u00edneas l\u00e1ser: 405 nm, 488 nm, 561 nm y 635 nm, y un cabezal de escaneo de disco giratorio Yokogawa con una c\u00e1mara EM-CCD y un sistema de incubaci\u00f3n en etapa para im\u00e1genes confocales de alta velocidad de c\u00e9lulas vivas en cultivo. El software de adquisici\u00f3n es Zen Blue (ZEN 2.3).<\/p>\n Objetivos: 5x\/0.25, 10x\/0.45, 20x\/0.8, Aceite 40x\/1.3, 63x\/1.4, Aceite, Aceite 100x\/1.4<\/p>\n<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n Microscopio invertido con l\u00edneas l\u00e1ser: 405, 445, 488, 514, 561, 594, 640, 730 nm. Capacidades de detecci\u00f3n de longitud de onda en la regi\u00f3n NIR de hasta 890 nm a trav\u00e9s de un conjunto de detectores GaAs NIR y sensibles a NIR especialmente dise\u00f1ados permiten hasta 6 canales para im\u00e1genes multiplexadas desde violeta hasta NIR (400 nm \u2013 890 nm), esc\u00e1ner resonante para im\u00e1genes de lapso de tiempo. Objetivos de silicona de larga distancia de trabajo permiten im\u00e1genes microsc\u00f3picas detalladas en profundidad. Equipado con una c\u00e1mara de incubaci\u00f3n Tokai Hit para mantener temperatura, CO2 y humedad \u00f3ptimas para im\u00e1genes de c\u00e9lulas vivas. Sistema de compensaci\u00f3n de deriva Z TruFocus que mantiene el enfoque durante las im\u00e1genes de c\u00e9lulas vivas a pesar de los cambios de temperatura o la adici\u00f3n de reactivos. El software de adquisici\u00f3n es FV31S-SW.<\/p>\n Objetivos: 4x\/0.16, 20x\/0.8, 30x\/1.05 Sil, 40x\/1.25 Sil, 60x\/1.5 Aceite, 100x\/1.35 Sil.<\/p>\n<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n El CellVoyager es un sistema de imagen confocal de disco giratorio dual de alto contenido, dise\u00f1ado para la adquisici\u00f3n r\u00e1pida de im\u00e1genes 3D de alta calidad de c\u00e9lulas vivas y fijadas, organoides y muestras de tejido. Integra capacidades de incubaci\u00f3n para la regulaci\u00f3n de temperatura, CO\u2082 y humedad.<\/p>\n El sistema cuenta con cuatro longitudes de onda de l\u00e1ser de excitaci\u00f3n (405, 488, 561 y 640 nm) y cuatro conjuntos de filtros de emisi\u00f3n (BP447\/60, BP525\/50, BP599\/44 y BP710\/80). La imagen se captura utilizando dos c\u00e1maras sCMOS de alta sensibilidad que admiten excitaci\u00f3n simult\u00e1nea de doble longitud de onda. Cada c\u00e1mara ofrece una resoluci\u00f3n de 2000 \u00d7 2000 p\u00edxeles.<\/p>\n Acomoda una amplia variedad de placas de muestras, incluyendo placas de pocillos m\u00faltiples (de 6 a 1536 pocillos), portaobjetos de vidrio, c\u00e1maras de cubres de vidrio y placas de 35 mm. Soporta modalidades de imagen de confocal, epifluorescencia y campo claro con enfoque autom\u00e1tico basado en l\u00e1ser e imagen, asegurando la adquisici\u00f3n de im\u00e1genes estables durante largos per\u00edodos. El software de adquisici\u00f3n es CQ Measurement.<\/p>\n Objetivos: 4x\/0.16, 10x\/0.4, 20x\/0.45, 20x\/1.0 W, 40x\/0.95 y 60x\/1.2 W con opciones de seco, inmersi\u00f3n en agua y distancia de trabajo larga.<\/p>\n<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<\/div>\n<\/div>\n<\/div>\n <\/p>\n <\/p>\n Este microscopio est\u00e1 equipado con l\u00edneas l\u00e1ser de 405, 445, 488, 515, 561 y 638 nm. Es ideal para la obtenci\u00f3n de im\u00e1genes de grandes vol\u00famenes 3D o 4D. Es un sistema independiente de caja sellada con control de temperatura y CO2. Tambi\u00e9n cuenta con dos c\u00e1maras sCMOS PCO.Edge. El software de adquisici\u00f3n es Zen Black (ZEN 2014 SP1).<\/p>\n Objetivos de iluminaci\u00f3n: dos de 5x\/0.1 y dos de 10x\/0.2 <\/p>\n <\/p>\n Este esc\u00e1ner de portaobjetos virtual est\u00e1 equipado con un cargador automatizado para 100 portaobjetos y m\u00faltiples modalidades de imagen. Los cubos de filtros de fluorescencia incluyen: DAPI, FITC, TRITC y CY5. El sistema tambi\u00e9n aprovecha una rueda de filtros de emisi\u00f3n adicional que permite el uso de un excitador de banda cu\u00e1druple. Adem\u00e1s, este sistema puede capturar im\u00e1genes con campo claro (histolog\u00eda). El software de adquisici\u00f3n es VS-ASW.<\/p>\n Objetivos: 2x\/0.08, 4x\/0.16, 10x\/0.4, 20x\/0.75 y 40x\/0.95.<\/p>\n<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n Escaneo automatizado de hasta 100 portaobjetos en una sola pasada. Es posible la generaci\u00f3n de im\u00e1genes tanto de fluorescencia como de campo claro. Este sistema est\u00e1 equipado con una fuente de luz LED Colibri 7 con excitaci\u00f3n a 385, 430, 475, 555, 590, 630, 735 nm. Im\u00e1genes de campo claro con c\u00e1mara color Axiocam 705 e im\u00e1genes de fluorescencia con c\u00e1mara Axiocam 712. Cuenta con una rueda de filtros de 10 posiciones que consta de juegos de filtros de banda \u00fanica para im\u00e1genes espec\u00edficas: FS96 para DAPI, FS38 para AF488, FS43 para AF555, FS64 para AF594, FS50 para AF647 y juegos de filtros multibanda para im\u00e1genes r\u00e1pidas: FS90- DAPI, AF488, AF555, AF647 y FS110- DAPI, AF488, AF594, AF750. El software de adquisici\u00f3n es Zen Blue (ZEN 3.9).<\/p>\n Objetivos: 5x\/0.25, 10x\/0.45, 20x\/0.5, 20x\/0.8, 40x\/0.95.<\/p>\n<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n Escaneo automatizado de hasta 100 portaobjetos en una sola ejecuci\u00f3n. Es posible la imagen de fluorescencia y de campo claro. Este sistema est\u00e1 equipado con una fuente de luz LED Colibri 7 con excitaci\u00f3n a 385, 430, 475, 555, 590, 630, 735 nm. Imagen de campo claro con c\u00e1mara a color Axiocam 705 e imagen de fluorescencia con c\u00e1mara Orca Flash. Cuenta con una rueda de filtros de 6 posiciones que consta de un juego de filtros de banda \u00fanica para imagen espec\u00edfica: FS90 para AF488, AF555, AF647, FS64 para AF594 y juegos de filtros multibanda para imagen r\u00e1pida: FS110 para imagen r\u00e1pida de DAPI, AF488, AF594, AF750. El software de adquisici\u00f3n es Zen Blue (ZEN 3.10).<\/p>\n Objetivos: 5x\/0.25, 10x\/0.45, 20x\/0.8, 40x\/0.9<\/p>\n<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<\/div>\n<\/div>\n<\/div>\n <\/p>\n <\/p>\n Este microscopio invertido est\u00e1 equipado con las siguientes l\u00edneas l\u00e1ser: 405, 488, 561 y 635 nm, y cuatro juegos de filtros de color para im\u00e1genes de superresoluci\u00f3n PAL-M y SR-SIM. Est\u00e1 equipado con dos c\u00e1maras EM-CCD, una c\u00e1mara Andor iXon3 897 de 512\u00d7512 a 35 fps para im\u00e1genes PAL-M en modo TIRF y una c\u00e1mara Andor iXon3 888 de 1024\u00d71024 a 9 fps para 3D SR-SIM. El microscopio tambi\u00e9n cuenta con una estaci\u00f3n de trabajo de procesamiento dedicada fuera de l\u00ednea para la reconstrucci\u00f3n de conjuntos de datos de im\u00e1genes de superresoluci\u00f3n. El software de adquisici\u00f3n es Zen Black (Zen 2.3 SP1).<\/p>\n Objetivos: 10x\/0.3, 63x\/1.4, 100x\/1.46, 100x\/1.57<\/p>\n<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n Este microscopio invertido est\u00e1 configurado para im\u00e1genes de s\u00faper resoluci\u00f3n TIRF, epifluorescencia, iluminaci\u00f3n HILO y PALM\/STORM. Est\u00e1 equipado con las siguientes l\u00edneas de l\u00e1ser: 405nm, 488, 561 y 640. Dos bandas de imagen simult\u00e1neas y juegos de filtros l\u00e1ser. La alineaci\u00f3n autom\u00e1tica TIRF, el enfoque autom\u00e1tico y la compensaci\u00f3n de deriva\/vibraci\u00f3n est\u00e1n integrados. El software incluye an\u00e1lisis smFRET, seguimiento de part\u00edculas individuales, localizaci\u00f3n en tiempo real, programaci\u00f3n de l\u00e1ser, interfaz de scripts de Python y an\u00e1lisis de colocalizaci\u00f3n.<\/p>\n Objetivo: 100x\/1.45<\/p>\n<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<\/div>\n<\/div>\n<\/div>\n <\/p>\n <\/p>\n Este microscopio de microdisecci\u00f3n aprovecha portaobjetos de membrana especializados para cortar y recolectar secciones microsc\u00f3picas de tejido o c\u00e9lulas individuales en capsulas adhesivas de tubos Eppendorf. Posteriormente, el an\u00e1lisis de las subregiones elegidas o las c\u00e9lulas aisladas puede procesarse para an\u00e1lisis de ADN, ARN y prote\u00ednas. El software de adquisici\u00f3n es PALMRobo V4.5<\/p>\n Objetivos: 5x\/0.25, 10x\/0.5, 40x\/0.6<\/p>\n<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<\/div>\n<\/div>\n<\/div>\n \n<\/div>\n <\/p>\n <\/p>\n Microscopio electr\u00f3nico de transmisi\u00f3n (TEM) Carl Zeiss Libra 120kV PLUS con filtro de energ\u00eda, equipado con una c\u00e1mara CCD YAG acoplada por fibra \u00f3ptica de 2kx2k capaz de generar im\u00e1genes de montaje con alta sensibilidad y un filtro de energ\u00eda interno que produce im\u00e1genes de alto contraste, mejora las relaciones se\u00f1al\/ruido en las im\u00e1genes, as\u00ed como espectroscop\u00eda de p\u00e9rdida de energ\u00eda de electrones (EELS), que permite el an\u00e1lisis elemental de muestras. Adem\u00e1s, el TEM est\u00e1 equipado con un portamuestras inclinable (+\/- 75 grados) para im\u00e1genes tomogr\u00e1ficas, un filtro de energ\u00eda interno para p\u00e9rdida de electrones y obtener im\u00e1genes de alto contraste de muestras biol\u00f3gicas, y una platina enfriada criog\u00e9nicamente para la obtenci\u00f3n de im\u00e1genes nativas de prote\u00ednas y cortes congelados e hidratados. La platina tambi\u00e9n est\u00e1 dise\u00f1ada para inclinaci\u00f3n en un solo eje para realizar criotomograf\u00eda.<\/p>\n<\/li>\n<\/ul>\n<\/div>\n<\/div>\n<\/div>\n <\/p>\n <\/p>\n Microscopio Electr\u00f3nico de Barrido con Ca\u00f1\u00f3n de Emisi\u00f3n de Campo de Presi\u00f3n Variable SIGMA de Carl Zeiss (SEM) equipado con detectores de electrones secundarios (SE), electrones retrodispersados (BSE) y presi\u00f3n variable (VPSE), detector STEM y etapa fr\u00eda. El sistema tambi\u00e9n est\u00e1 equipado con hardware\/software para el m\u00f3dulo de creaci\u00f3n de im\u00e1genes compuestas ATLAS y el m\u00f3dulo de navegaci\u00f3n de microscop\u00eda correlativa Shuttle and Find para generar im\u00e1genes mosaico grandes y flujos de trabajo de alto rendimiento.<\/p>\n<\/li>\n<\/ul>\n<\/div>\n<\/div>\n<\/div>\n <\/p>\n <\/p>\n El Gatan 3View es un sistema de microscop\u00eda electr\u00f3nica de barrido de cara de bloques en serie (SBFSEM) totalmente automatizado. Un ultramicrotomo est\u00e1 montado dentro de la c\u00e1mara de vac\u00edo del microscopio electr\u00f3nico de barrido SIGMA. El 3View secciona e \nimagina autom\u00e1ticamente la cara expuesta del bloque. Los conjuntos de datos generados se pueden combinar para crear pilas de nubes de un volumen y luego segmentarse posteriormente.<\/p>\n<\/li>\n<\/ul>\n<\/div>\n<\/div>\n<\/div>\n \n<\/div>\n <\/p>\n El n\u00facleo de BPHO cuenta con un espacio dedicado para la preparaci\u00f3n de muestras dentro de la instalaci\u00f3n, incluyendo el procesamiento para microscop\u00eda electr\u00f3nica. La instrumentaci\u00f3n para la preparaci\u00f3n de muestras incluye:<\/p>\n Por favor, solicite m\u00e1s informaci\u00f3n: bpho@salk.edu<\/a>.<\/p>\n \u00a0<\/p>\n El n\u00facleo BPHO proporciona el procesamiento de muestras por personal capacitado y experto utilizando protocolos establecidos, que se describen a continuaci\u00f3n:<\/p>\n El BPHO mantiene un conjunto de software personalizado, comercial y de c\u00f3digo abierto para el procesamiento y an\u00e1lisis de im\u00e1genes multimodales para aplicaciones de microscop\u00eda \u00f3ptica y electr\u00f3nica. El n\u00facleo est\u00e1 equipado con servidores de almacenamiento para el almacenamiento de datos tanto a corto como a largo plazo, y seis estaciones de trabajo para an\u00e1lisis de im\u00e1genes. Estas estaciones de trabajo est\u00e1n integradas con software de microscop\u00eda de Zeiss (ZEN), Olympus, Gatan, as\u00ed como con soluciones de software de c\u00f3digo abierto basadas en aprendizaje autom\u00e1tico. Adicionalmente, las estaciones de trabajo est\u00e1n equipadas con paquetes de software como Imaris, ImageJ\/Fiji, QuPath.<\/p>\n El N\u00facleo BPHO ofrece capacitaci\u00f3n y equipos tanto para microscop\u00eda \u00f3ptica como electr\u00f3nica, procesamiento de muestras, obtenci\u00f3n de im\u00e1genes y an\u00e1lisis. Adem\u00e1s de la Directora, la Dra. Daniela Boassa, el BPHO cuenta con dos especialistas en imagen a tiempo completo, la Dra. Elsie Quansah y Chynna Bowman, quienes tienen experiencia en microscop\u00eda \u00f3ptica y electr\u00f3nica, as\u00ed como en an\u00e1lisis de datos.<\/p>","protected":false},"author":3,"featured_media":0,"parent":520,"menu_order":0,"comment_status":"closed","ping_status":"closed","template":"template-core-facilities-resources.php","meta":{"_acf_changed":false,"footnotes":""},"folder":[525],"class_list":["post-2968","page","type-page","status-publish","hentry"],"acf":[],"yoast_head":"\nInstrumentaci\u00f3n<\/h2>\n
Equipamiento disponible para uso del n\u00facleo:<\/h4>\n
\nMicroscopios \u00f3pticos<\/h2>\n
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\nObjetivos: 10x\/0.45, 20x\/0.8, 40x\/1.0 W, 40x\/1.0 Aceite , 63x\/1.4 Aceite \u2013 Equipado con un m\u00f3dulo de Enfoque Definido e incubaci\u00f3n para im\u00e1genes de lapso de tiempo extendido de c\u00e9lulas vivas. La c\u00e1mara de incubaci\u00f3n permite la regulaci\u00f3n de temperatura y CO2.<\/p>\n
\nObjetivos: 10x\/0.3, 20x\/0.8, 40x\/1.0 W, 63x\/1.4 Aceite, 63x\/1.46 Aceite \u2013 Equipado con un m\u00f3dulo de Enfoque Definido e incubaci\u00f3n para im\u00e1genes de lapso de tiempo prolongado de c\u00e9lulas vivas. La c\u00e1mara de incubaci\u00f3n permite la regulaci\u00f3n de temperatura y CO2.<\/p>\n
\nObjetivos: 10x\/0,45, 20x\/0,8, 20x\/1,0 W, 63x\/1,4 Aceite \u2013 No est\u00e1 configurado para imagenolog\u00eda de c\u00e9lulas vivas.<\/p>\n<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n\n
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\nObjetivos de detecci\u00f3n: 5x\/0.16, 10x\/0.5 y 20x\/1.0 tanto para CLARITY como para inmersi\u00f3n en agua.<\/p>\n<\/li>\n<\/ul>\n<\/div>\n<\/div>\n<\/div>\n\n
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\nMicroscopios electr\u00f3nicos<\/h2>\n
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\nInstrumentaci\u00f3n y servicios para la preparaci\u00f3n de muestras<\/h2>\n
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\nAn\u00e1lisis y Almacenamiento de Datos<\/h2>\n
\nEnlaces de informaci\u00f3n sobre microscop\u00eda<\/h2>\n
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