Este microscopio invertido está equipado con las siguientes líneas láser (405, 488, 561 y 635 nm) y cuatro conjuntos de filtros de color para imágenes de superresolución PAL-M y SR-SIM. Está equipado con dos cámaras EM-CCD, una cámara Andor iXon3 897 512×512 35fps para imágenes PAL-M en modo TIRF y una cámara Andor iXon3 888 1024×1024 9 fps para 3D SR-SIM. El microscopio también tiene una estación de trabajo de procesamiento fuera de línea dedicada para la reconstrucción de conjuntos de datos de imágenes de súper resolución.
Este microscopio invertido está equipado con las siguientes líneas láser (405, 458, 488, 514, 561, 594 y 633nm). También está equipado con un detector GAsP interno de 34 elementos para imágenes espectrales completas sensibles a una sola molécula sobre el espectro visible y un detector de luz transmitida para imágenes DIC.
Este microscopio invertido está equipado con las siguientes líneas láser (405, 458, 488, 514, 561, 594 y 633nm). También está equipado con un detector GAsP interno de 34 elementos para imágenes espectrales completas sensibles a una sola molécula sobre el espectro visible y un detector de luz transmitida para imágenes DIC. También está equipado con un módulo Definite Focus para imágenes de lapso de tiempo extendido de células vivas.
Este microscopio invertido está equipado con las siguientes líneas láser (405, 458, 488, 514, 561, 594 y 633nm). También está equipado con un detector interno de 34 elementos para imágenes espectrales completas sobre el espectro visible y un detector de luz transmitida para imágenes DIC. También está equipado con un módulo Definite Focus para imágenes de lapso de tiempo extendido de células vivas.
Este microscopio invertido está equipado con las siguientes líneas láser (405, 488, 561 y 635nm) y un cabezal de exploración de disco giratorio Yokogawa con una cámara EM-CCD y un sistema de incubación en la parte superior del escenario para obtener imágenes confocales de alta velocidad de células vivas en cultura.
Este sistema de obtención de imágenes de células vivas está equipado con las siguientes líneas láser (405, 488 y 561) y un cabezal de escaneo de disco giratorio de orificio doble Yokogawa con una cámara EM-CCD y un sistema de incubación en la parte superior del escenario para la obtención de imágenes confocales de alta velocidad de células vivas en cultivo.
Este microscopio vertical está equipado con las siguientes líneas láser de un solo fotón (405, 440, 488, 514, 559, 633 nm), así como un láser infrarrojo Spectra-Physics MaiTai DeepSee para excitación de dos fotones. Está equipado con 3 detectores internos descaneados, así como 4 detectores de fluorescencia de dos fotones no descaneados y 2 detectores de fluorescencia de barrido directo para la segunda generación de armónicos (SHG) y la microscopía Coherent Anti-Stokes Raman (CARS).
Este microscopio invertido está equipado con las siguientes líneas láser (405, 488, 561 y 635nm), una cámara Andor EM-CCD y el módulo PerfectFocus patentado de Nikon para imágenes TIRF. También está equipado con un sistema de incubación en la parte superior del escenario para mantener las células vivas en cultivo.
Este escáner de diapositivas virtual está equipado con un cargador automático de 100 diapositivas y múltiples modalidades de imágenes. Los cubos de filtros fluorescentes incluyen: DAPI, FITC, TRITC y CY5. El sistema también aprovecha una rueda de filtro de emisión adicional que permite el uso de un excitador de banda cuádruple. Además, este sistema puede generar imágenes con campo claro (histología).
Este microscopio de microdisección aprovecha los portaobjetos de membrana especializados para cortar y recolectar secciones microscópicas de tejido o células individuales. Al capturar la muestra en tubos Eppendorf, el usuario puede realizar más análisis en las subregiones o celdas elegidas.
Este microscopio fluorescente invertido está equipado con cubos de filtro DAPI, FITC y TRITC. El sistema también está equipado con un módulo vivatome que permite el seccionamiento de la muestra de forma confocal.
El estereoscopio V12 está equipado con tres lentes diferentes que permiten obtener imágenes ideales para disección o imágenes de fluorescencia de muestras grandes.
Carl Zeiss Libra 120kV PLUS Energy Filtered Transmission Electronic Microscope (TEM) que está equipado con una cámara CCD YAG acoplada por fibra óptica de 2kx2k capaz de montar imágenes a alta sensibilidad y tiene un filtro de energía en la columna que produce imágenes de alto contraste, que mejora relaciones señal/ruido en imágenes, así como espectroscopía de pérdida de energía de electrones (EELS), que permite el análisis elemental de muestras. Además, el TEM también está equipado con un portamuestras inclinado (+/- 75 grados) para imágenes tomográficas, un filtro de energía en columna para la pérdida de electrones y la obtención de imágenes de alto contraste de muestras biológicas, y una platina enfriada criogénicamente para la obtención de imágenes nativas. de proteínas y secciones congeladas e hidratadas. La platina también está diseñada para inclinarse en un solo eje para realizar criotomografías.
Microscopio electrónico de barrido (SEM) con pistola de emisión de campo de presión variable SIGMA de Carl Zeiss que está equipado con detectores de electrones secundarios (SE), electrones retrodispersados (BSE) y presión variable (VPSE), detector STEM y etapa fría. El sistema también está equipado con hardware/software para el módulo de imágenes de montaje ATLAS y el módulo de navegación de microscopía correlativa Shuttle and Find para generar grandes imágenes en mosaico y un flujo de trabajo de alto rendimiento.
El Gatan 3View es un sistema de microscopio electrónico de barrido de cara de bloque en serie (SBFSEM) completamente automatizado. Se monta un ultramicrótomo dentro de la cámara de vacío del SIGMA SEM. El 3View secciona automáticamente y toma imágenes de la cara del bloque expuesta. Los conjuntos de datos generados se pueden combinar para crear z-stacks de un volumen y luego segmentarlos manualmente.
El núcleo BPHO tiene un espacio de preparación de muestras EM dedicado dentro de la instalación para procesar muestras para microscopía electrónica. La instrumentación de preparación de muestras incluye:
Pared de equilibrio, prueba de cilindro, fuerza de agarre, exploración de la marcha, desafío de escalera, campo abierto, rotarod, rotómetro, monitor de actividad, cinta de correr, medidor de analgesia de placas frías y calientes y acantilado visual. Von Frey
Laberinto de Barnes, respuesta de sobresalto, condición de miedo, laberinto acuático de Morris, reconocimiento de objetos novedosos, evitación pasiva y laberinto en Y.
Laberinto en cruz elevado, caja clara/oscura, inhibición previa al pulso, aparato de interacción social, aseo personal espontáneo, sistema de telemetría para monitorear el sueño y las convulsiones y laberinto en Y. Prueba de natación de Porsolt
El citómetro Becton-Dickinson FACSCanto II™ es un citómetro de flujo analítico de 3 láseres (8 colores) fácil de operar.
405nm 30mW -2 detectores (450/50BP, 525/50BP)
488nm 20mW – 4 detectores (530/30BP, 585/42BP, 670LP, 780/60BP)
633nm 17mW – 2 detectores (660/20BP, 780/60BP)
El diseño óptico patentado presenta fibra óptica y una celda de flujo de cubeta acoplada a gel. Las señales fluorescentes se recopilan utilizando conjuntos de detectores de recolección de octágono/trigón altamente eficientes que usan reflejos de luz en serie para guiar las señales a sus detectores de destino, lo que da como resultado una recolección de luz altamente eficiente y proporciona la máxima retención de señal en el nivel del detector. Este diseño reflectante en serie de BD mejora aún más la sensibilidad del instrumento al recopilar primero las señales de emisión más tenues, pasando de las longitudes de onda más largas (normalmente PE-Cy™7) a las más cortas (FITC) para maximizar la detección de señales, aumentando la sensibilidad y la resolución. El tubo de inyección de muestra cuenta con una función de enjuague que lava automáticamente la sonda entre los tubos para reducir la contaminación cruzada de la muestra.
El citómetro ejecuta el software de adquisición BD FACSDiva.
El Becton-Dickinson FACScan es un citómetro de flujo analítico de un solo láser fácil de operar. La excitación se realiza a través de una línea láser de 488 nm. Además de los parámetros de dispersión habituales, se pueden detectar 3 colores de fluorescencia para cada celda: los filtros fijos son verde (530/30), naranja (585/42) y rojo (650 LP). El instrumento tiene una opción de procesamiento de pulsos para la discriminación de dobletes.
El Becton-Dickinson LSR II es un citómetro de flujo analítico de 5 colores y 15 láseres. El citómetro ejecuta el software de adquisición BD FACSDiva.
El Becton-Dickinson FACS Vantage SE DiVa es un clasificador de células multiláser multicolor de alta velocidad.
Fuentes de excitación
Láser de estado sólido Coherent CUBE 405: 100 mW a 407 nm
Láser de estado sólido Coherent Sapphire de 488 nm: 200 mW a 488 nm
Láser de estado sólido Coherent Sapphire de 568 nm: 200 mW a 568 nm
La electrónica digital Becton-Dickinson (BD) DiVa™ permite generar la altura, el área y el ancho del pulso para los parámetros detectados. Se pueden clasificar celdas regulares o grandes. La electrónica DiVa™ permite la clasificación de hasta 4 poblaciones simultáneamente, o las células se pueden clasificar en placas de múltiples pocillos (formato de placa de hasta 96w).
BD InFlux™
El citómetro Becton-Dickinson Influx™ es un clasificador de células jet-in-air de alta velocidad con 13 láseres y 5 parámetros de última generación.
Fuentes de excitación
355nm 60mW – 2 detectores (460/50BP, 670/30BP)
405nm 100mW -2 detectores (460/50BP, 520/35BP)
488nm 200mW – 2 detectores (530/40BP, 692/40BP)
561nm 150mW – 3 detectores (593/40BP, 670/30BP, 750LP)
640nm 120mW – 2 detectores (670/30BP, 750LP)
Para lograr una electrónica muy sensible y de bajo ruido, el sistema BD Influx utiliza electrónica analógica en la primera etapa de amplificación de la señal. La salida del circuito analógico de pico y retención se digitaliza utilizando ADC de 16 bits y se coloca en un bus digital de procesamiento paralelo patentado. El bus maneja la compensación en tiempo real, así como otras señales digitalizadas, incluido el área y el ancho de hasta 8 pulsos adicionales.
El Influx tiene varios tamaños de boquilla disponibles para acomodar una variedad de tamaños de partículas y puede clasificar 6 poblaciones simultáneamente (para tipos de muestras adecuados). Las células se pueden clasificar en una variedad de tipos de tubos o placas de múltiples pocillos (p. ej., 384 pocillos).
Además, el BD Influx™ está equipado con una opción de gestión de aerosoles; el aire se extrae del operador a través de un filtro HEPA, lo que reduce la cantidad de aerosoles en la cámara de clasificación para un mayor nivel de seguridad.
El sistema de PCR rápido en tiempo real 7900HT es el sistema de PCR cuantitativo en tiempo real que combina compatibilidad con placas de 96 y 384 pocillos y la matriz de baja densidad TaqMan® con carga robótica totalmente automatizada, y también ofrece la capacidad opcional de PCR rápido en tiempo real.
El bioanalizador Agilent 2100 es una plataforma basada en microfluidos para el dimensionamiento, cuantificación y control de calidad de ADN y ARN.
Illumina HiSeq 2500 es un secuenciador de próxima generación de ultra alto rendimiento. Utiliza la química de secuenciación por síntesis (SBS) con terminadores reversibles y una polimerasa de ADN altamente eficiente modificada para aceptar nucleótidos de terminación reversible, marcados con cuatro colorantes fluorescentes diferentes. Un escáner de integración retardada en el tiempo (TDI) y cuatro sensores CCD toman imágenes de alta resolución. Los tintes fluorescentes en los nucleótidos se escinden después de la obtención de imágenes y los terminadores reversibles se eliminan para permitir la extensión de la cadena para el siguiente ciclo. La óptica HiSeq puede generar imágenes de doble superficie para procesar tanto la parte superior como la inferior de la celda de flujo, lo que permite generar hasta 500 gigabases (Gb) por ejecución y 167 Gb por día. El sistema de secuenciación de HiSeq se puede operar en modo de celda de flujo simple o doble para permitir la flexibilidad de adaptarse a las necesidades de diferentes usuarios para diferentes longitudes de lectura y parámetros de ejecución.
El sistema Illumina cBot proporciona amplificación clonal completamente automatizada de miles de millones de bibliotecas de secuenciación de ADN de una sola molécula que producen grupos, que se distribuyen aleatoriamente en Illumina HiSeq Flowcell en menos de 3 horas. Las celdas de flujo están listas para secuenciarse después de agruparse en el sistema cBot.
El secuenciador Illumina NextSeq 500 utiliza la misma química comprobada de SBS de terminador reversible sin la necesidad de recopilar suficientes muestras para iniciar un experimento de secuenciación. Este secuenciador está especialmente diseñado para experimentos piloto y sensibles al tiempo. NextSeq 500 puede producir hasta 100 Gb por día con 400 millones de lecturas que pasan el filtro.
El sistema NeoPrep es un sistema de microfluidos digital, que puede preparar de forma reproducible bibliotecas de secuenciación de ADN y ARN de alta calidad utilizando cantidades bajas de ácido nucleico como entrada, con un tiempo de manipulación mínimo y una ausencia total durante el proceso. Con este sistema, un solo operador puede preparar bibliotecas de secuenciación de hasta 16 muestras en menos de 10 horas, lo que reduce significativamente el tiempo de manipulación, la variabilidad entre experimentos y la contaminación cruzada potencial de muestras preciosas.
La TapeStation Agilent 2200 es un instrumento completo de control de calidad para ácidos nucleicos. La TapeStation automatiza la carga, separación e imagen de ARN y ADN. Cada ejecución puede procesar hasta 16 muestras en tan solo 2 minutos por muestra. La TapeStation es nuestro instrumento más sensible para detectar ADN de tan solo 10 pg/uL o 100 pg/uL para ARN. La TapeStation puede detectar ácidos nucleicos desde 50bp hasta 15kB y solo requiere 1uL de muestra.
El sonicador Covaris M220 proporciona una fragmentación reproducible y precisa de ácidos nucleicos y cromatina. Puede transmitir energía acústica a frecuencias ultrasónicas de forma isotérmica sin contactos con sondas. Los programas Covaris precargados pueden generar tamaños de fragmentos entre 150bp y 5000bp, en 15uL hasta 1ml de volumen.
El sistema QX200 ddPCR proporciona una medida absoluta de las moléculas de ADN diana con alta sensibilidad utilizando ensayos basados en sonda Taqman o Evagreen. El sistema QX200 ddPCR se puede aplicar para determinar variaciones en el número de copias (CNV), mutación, análisis de expresión génica, enriquecimiento de secuencias objetivo raras y cribados de clones CRISPR/Cas9. Cada ejecución puede procesar hasta 96 muestras con cada reacción dividida en 20,000 1.5 o más gotas de emulsión, con un total de aproximadamente XNUMX millones de gotas por placa.
El fluorómetro Qubit puede detectar ADN, ARN y proteínas mediante ensayos de cuantificación Qubit. La concentración de se determina mediante la asociación de colorantes fluorométricos y moléculas diana, lo que elimina la sobrestimación en presencia de contaminantes.
El lector de placas TECAN M200 está equipado con excitación y emisión de fluorescencia sintonizable con un rango de 230nm-850nm y luminiscencia. Las muestras pueden calentarse desde temperatura ambiente hasta 42 °C o mezclarse mediante agitación orbital. El sistema también está equipado con el software Magellan para detección programable y análisis automatizado.
El EpiShear es un procesador ultrasónico programable (120 W), que puede cortar cromatina o ADN de 500 ul a 15 ml. Se ha demostrado que el cizallamiento de cromatina para la inmunoprecipitación de cromatina (ChIP) es reproducible y robusto. La acumulación de calor en muestras sensibles a la temperatura puede evitarse mediante el modo pulsado y los bloques fríos.
Este instrumento es capaz de sintetizar dos péptidos a la vez, a escalas de 100, 300 o 500 uM. El sistema de monitoreo UV en tiempo real proporciona retroalimentación para que los tiempos de desprotección y acoplamiento se alarguen automáticamente para la secuencia problemática, para garantizar que cada ciclo se complete.
El espectrómetro de masas Thermo Orbitrap Fusion combina sus tres analizadores de masas: cuadrupolo, Orbitrap y trampa de iones lineal en una arquitectura Tribrid que proporciona una profundidad de análisis sin precedentes para muestras biológicas complejas. Puede realizar una amplia variedad de análisis, desde la caracterización de PTM complejos hasta análisis completos cualitativos y cuantitativos. Están disponibles múltiples técnicas de fragmentación (CID, HCD y ETD) con detección de iones de fragmentos en la trampa de iones o en el analizador de masas Orbitrap.
El espectrómetro de masas Thermo Q-Exactive combina la selección de precursores de cuadrupolo con detección Orbitrap de masa precisa y de alta resolución. Genera datos MS y MS/MS de alta calidad. Su avanzada tecnología de cuadrupolo mejora la cuantificación de iones de baja abundancia en matrices complejas.
El espectrómetro de masas de triple cuadrupolo TSQ Quantiva emplea Active Ion Management (AIM) para optimizar la creación y transmisión de iones desde la fuente al detector, lo que resulta en una sensibilidad extrema. Este nivel mejorado de sensibilidad mejora en gran medida los resultados en aplicaciones tales como experimentos de MS dirigidos de alto rendimiento y cuantificación dirigida de moléculas pequeñas.
Este instrumento híbrido consiste en una trampa de iones lineal y un analizador de transformada de Fourier electrostático y está equipado con una fuente de nano-spray. El instrumento ofrece una alta sensibilidad, en el rango bajo de femtomoles para péptidos, y precisiones de masa en el rango de ppm. El instrumento se utiliza para el análisis proteómico de proteínas separadas por electroforesis en gel o por cromatografía bidimensional (MudPIT). Las masas de los precursores se determinan en el Orbitrap de alta resolución con una precisión de <10 ppm. La fragmentación se logra por disociación colisional o de mayor energía (CID o HCD). Además de los análisis proteómicos, el instrumento es capaz de analizar pequeñas proteínas intactas para obtener masas precisas.
Este sistema de imágenes reside dentro de una incubadora de cultivo de células de CO2 dedicada para experimentos de imágenes de células vivas extendidas. Es capaz de contraste de fase más detección de fluorescencia roja/verde. Este sistema tiene objetivos de 4x, 10x y 20x, y puede aceptar una amplia variedad de placas de cultivo celular estándar y placas de pocillos múltiples.
Imagen de células fijas o vivas en formato de 6-384 pocillos con campo brillante y/o fluorescencia RGB
(Olympus) con una amplia gama de cubos de filtro para fluoróforos comunes. El núcleo cuenta con dos de estos microscopios, ambos con cámaras ccd monocromáticas, uno también equipado con cámara a color.
Estos "scopios de selección" se utilizan para la derivación de colonias de iPSC y la manipulación de cultivos de células madre.
Una Nikon Eclipse TE 300 y una Diaphot 300 equipadas para campo claro, contraste de fase y contraste de interferencia diferencial Nomarski. Los microscopios tienen capacidades tanto de fotografía fija como de video de 35 mm.
Los micromanipuladores hidráulicos Narshige MO-188 y MN-188 están montados en los microscopios Nikon para la retención e inyección de embriones.
El sistema láser de Hamilton Thorne Biosciences elimina y rompe las membranas intracelulares y extracelulares y se utiliza para microinyecciones, fertilización in vitro asistida (FIV) e inyecciones intracitoplasmáticas de esperma (ICSI).
Un aislador de pistón de gas de cardán para aislamiento vertical y horizontal de vibraciones.
Los picoinyectores PLI-90 garantizan un proceso de inyección preciso y fácilmente controlable.
Un extractor de pipeta horizontal controlado por microprocesador Sutter Instrument P-97. Este extractor de pipetas se utiliza para la producción de pipetas de inyección, que se pueden reproducir de forma precisa y repetida.
El microscopio Alcatel consta de un filamento calefactor y soportes muy finamente ajustables para el pulido térmico de las pipetas de transferencia, creando las puntas estrechas de las pipetas de sujeción y la punta de las agujas de inyección de células ES.
5000 microincubadoras para inyecciones de células ES para controlar la temperatura en la platina del microscopio.
Un microscopio Nikon equipado para observación de campo claro y contraste de fase.
Se utiliza una campana de flujo laminar vertical con filtro HEPA modelo NU425-400 de Nuaire para los procedimientos de cultivo de tejidos.
Las incubadoras de CO2 Nuaire y Fisher, que están equipadas con monitoreo infrarrojo de CO2, aire filtrado HEPA y monitoreo de humedad, se utilizan para procedimientos de cultivo de tejidos y embriones.
Congelador de velocidad controlada
Se utiliza un congelador FTS Sysytems Bio Cool III, -80°C para la crioconservación de embriones.
Un sistema de crioconservación MVE 600 proporciona un almacenamiento fiable para células y embriones congelados en LN2 líquido o vapor.
Su asociación permite a nuestros científicos acelerar el ritmo de descubrimientos de alto riesgo y alta recompensa que tienen el potencial de beneficiar la salud de toda la humanidad, ya sea cáncer, enfermedad de Alzheimer, cambio climático, enfermedades infecciosas o más.
