Stammzellkern

Instrumentierung und Dienstleistungen

Salk Institute for Biological Studies – Stammzellenkern – Instrumente und Dienstleistungen

Instrumentierung und Dienstleistungen


Der Stammzellkern beherbergt 3 Zellkultursuiten, 2 Laborbänke und Zellanalyse. Jede Zellkultursuite ist mit 3-4 Biosicherheitswerkbänken, 6-8 CO2-Inkubatoren, einem Inkubator mit niedrigem Sauerstoffgehalt und umgekehrten Mikroskopen sowie der erforderlichen Ausrüstung für die Stammzellkultur ausgestattet. Der STEM Core befindet sich neben dem Kernanlage für Durchflusszytometrie Ermöglicht effiziente Experimente zur Zellsortierung und Zytometrieanalyse.

Anzeigen / Instrumente

Zellbildgebung
2x Dissektionsmikroskope zur manuellen Isolierung und Manipulation von Stammzellkolonien
SeaHorse 96XFe für die Zellanalyse

Zellkultur
11x Biologische Sicherheitswerkbänke
18x C02-Inkubatoren
3x N2/CO02-Inkubatoren (hypoxische Bedingungen)
3x Tischzentrifugen
3x 37°C Wasserbäder

Transfektion
LifeTech Neon – Spitzenbasierte Elektroporation (einstellbare Parameter)
MaxCyte ExPERT A+X Elektroporator (Küvettenbasiert; feste Parameter)

Zentrifugation
Optima L-80XP Ultrazentrifuge
Allegra X-15R Plattenzentrifuge
Tischzentrifuge und Mikrozentrifuge mit Temperaturregelung

Labor-Kühl- und Gefrierschränke
3x -80°C Gefrierschränke
10x -20°C Gefrierschränke
6x 4°C Kühlschränke
2 Feinkostkühlschränke mit hoher Kapazität
2x Cyrostorage-Gefrierschränke der MVE 800-Serie – 11664 Fläschchenkapazität, automatische Füllsteuerung

Services

Biopsieverarbeitung (Fibroblastenableitung)
Neuprogrammierung von Fibs oder PBMCs
Individuelle Genombearbeitung
iPSC QC (auf Anfrage)
  • Karyotypisierung
  • Mykoplasmen-Test
  • STR
  • Undiff
  • TriLin
  • Schwere Retention
Fib QC (auf Anfrage)
  • Mycoplasma
  • Wachstumsrate
  • STR-Profiling (nur Mensch)
Qualitätskontrolle der Genomeditierung (auf Anfrage)
  • Mykoplasma
  • Allelsequenzierung
  • STR

Zugang:
Die Stem Cell Core Facility steht Forschern 7 Tage die Woche und 24 Stunden am Tag zur Verfügung. Der Zugang zur Einrichtung muss im Voraus vereinbart und vom STEM Core genehmigt werden.

Nutzungsbedingungen:

  1. Der Core Director muss zunächst alle neuen Zelllinien genehmigen, die in die Einrichtung gebracht werden, einschließlich lebender und gefrorener Zellkulturen aus kommerziellen und akademischen Quellen. Alle neuen, zugelassenen Zelllinien werden unter Quarantänebedingungen kultiviert, bis sie in zwei aufeinanderfolgenden Tests frei von Mykoplasmen sind.
  2. Alle neuen STEM Core-Benutzer müssen vom Core Director oder Lab Manager genehmigt werden und eine kurze Einführung von ihm durchlaufen.
  3. Bringen Sie keine zuvor geöffneten Reagenzien, Vorräte oder Materialien aus anderen Laboren in die Einrichtung. In einigen Fällen kann dies erforderlich sein, muss aber zuerst mit dem Core Director geklärt werden. Ungeöffnete Zellkulturmedien und -materialien direkt vom Lieferanten dürfen in die Einrichtung gebracht werden.

SCRO-Genehmigungen, Ethikschulungen und MTAs:
Für jede Forschung am Salk Institute mit menschlichen pluripotenten Stammzellen ist Folgendes erforderlich:

  1. ein von der SCRO genehmigtes Protokoll und
  2. Ethikschulung für die an den Experimenten beteiligten Forscher und PI.

Bitte konsultieren Sie die SCRO Website Informationen zur Erfüllung dieser Anforderungen finden Sie unter. Die Genehmigungsanforderungen variieren je nach Forschungsprojekt. Der Core Director und das Personal können neuen Forschern beim Ausfüllen der SCRO-Protokolle behilflich sein. Zu Schulungszwecken können neue Forscher mit der Arbeit unter dem bestehenden Schulungsprotokoll für Stammzellkulturtechniken beginnen. Wenn der/die Forscher jedoch ihr eigenes Forschungsprojekt entwickeln, muss eine separate SCRO-Genehmigung eingeholt werden.

Informationen zur Ethikschulung finden Sie online Hier"

Salk-Forscher, die im STEM Core arbeiten, unterliegen den bestehenden MTAs für die bereitgestellten Zelllinien. Sollte ein Forscher eine der unten aufgeführten Zelllinien in seinem eigenen Labor kultivieren wollen, müsste ein separater MTA durchgeführt werden.

Verfügbare Zelllinien

Alle Zelllinien sind karyotypisch stabil, frei von Krankheitserregern und werden ohne Antibiotika kultiviert. Weitere Zelllinien auf Anfrage erhältlich.

Verfügbare humane embryonale Stammzelllinien:

ZellliniePassage # auf MEFSPassage # auf mtg/TeSR
H1p32p39
H7 p26 p28
H9p33p35
H13 p30 p32
FARBEN-3p29p30
FARBEN-6p21p24
FARBEN-8p32-
FARBEN-9-p33
LSJ-1-p24

Verfügbare humaninduzierte pluripotente Stammzelllinien:
Krankheitsspezifische iPSCs: Suchen Sie nach einer bestimmten krankheitsbedingten iPSC-Linie? Möglicherweise existiert es bereits und wir können Ihnen möglicherweise bei der Suche helfen.

ZellliniePassage # auf MEFSPassage # auf mtg/TeSR
BJ-iPSC p p
WiCell-iPSC - p33


Weitere verfügbare Zelltypen:
Keratinozyten – Erwachsene
Keratinozyten-Neo Natal
BJ-Fibroblasten
IMR90s
OP9s
293Ts
HFFs
MEFs
HUVEC

MTA-Überlegungen
Salk-Forscher, die im STEM Core arbeiten, unterliegen den bestehenden MTAs für die bereitgestellten Zelllinien. Sollte ein Forscher eine dieser Zelllinien in seinem eigenen Labor kultivieren wollen, müsste ein separater MTA durchgeführt werden.